继2019年推出Direct Swab Genotyping Master Mix以来,酷乐生物(ColeGen)针对DNA/RNA检测多种场景下的Direct PCR Mix再迎升级,现已陆续推出了兼容性更强的Direct PCR Mix(主要分为Direct Swab PCR Mix和Direct Blood PCR Mix)(产品详细清单见文末列表)。
Direct PCR:分子POCT的理想选择
在Direct PCR过程中,酶的抗抑制性以及PCR体系的兼容性,都会掣肘直扩PCR产品的产业化及商品化,主要短板体现在:
1)样本过多的前处理,比如加热、离心等,限制了其使用场景;
2)扩增效率过低,表现为Ct值延后;
3)抗抑制性差,导致qPCR荧光信号低,扩增效率低等。
酷乐生物的Direct PCR Mix,采用独有的抗抑制酶,搭配独家的缓冲体系,以原始样本或者粗裂解的血液样本为模板进行qPCR/RT-qPCR检测,全程无离心、无加热、无核酸提取纯化,多重检测的灵敏度和荧光信号可媲美磁珠法提取的qPCR结果,为qPCR检测带来前所未有的便捷。
*Direct Swab PCR Mix:主要针对非全血样本的直扩PCR检测,样本类型以鼻咽拭子、分泌物、粪便、血清/血浆、体液及培养物等非全血类样本为主。
推荐使用方法:直接以原始样本为模板进行qPCR/RT-qPCR检测。
已有合作产品案例:2019-nCoV、猴痘(MPV)、HPV-DNA、MTHFR等
*Direct Blood PCR Mix:主要针对含大量血红素的全血样本的直扩PCR检测,样本类型以全血、抗凝血、血斑等全血类样本为主。
推荐使用方法:室温瞬时释放后,直接取样进行qPCR/RT-qPCR检测。
已有合作产品案例:HBV、HCV、非洲猪瘟、猪瘟、法医STR产品等
酷乐生物Direct PCR优势
1. 免提取:全过程无加热、无离心、无提取纯化;
2. 兼容性更强:主要区分全血和非全血样本;
非全血类样本可直接以原始样本为模板进行qPCR检测;
全血样本与释放剂等比混合,瞬时释放,直接作为模板进行qPCR检测,即混即用。
3. 可冻干:所有Direct PCR mix均可提供常规型/可冻干型/防污染体系配方,体系、规格可接受个性化定制;
4. 范围广:DNA/RNA均可直扩PCR多重检测,可精确定量9个数量级;
5. 灵敏度高:HBV全血样本最低检测限为30IU/mL,HCV血清样本最低检测限为50IU/mL;
6. 开放平台:可兼容市场面常规荧光定量qPCR仪及快速荧光定量qPCR仪;
测试数据:
检测结果:
小结
在酷乐生物Direct Blood Genotyping Master Mix中,血液直扩和两种提取法的扩增效率相当。其中热裂解法核酸损失最小,磁珠法提取核酸损失较大,直扩法荧光信号值最高。
HBV灵敏度测试
使用全血样本为基质,稀释高浓度HBV血清样本后分别用直扩法和磁珠法提取后比较结果如下:
小结
在酷乐生物Direct Blood Probe qPCR Master Mix中,四组HBV血清样本经磁珠法提取和直扩法检测比较,其灵敏度和重复性表现良好,可满足临床应用。
如需了解更多样本类型(如分泌物样本、粪便样本、尿液、培养物等)DNA/RNA Direct PCR数据及试用装,可咨询厂家或索取。
产品选购方案,请参考如下:
产品详细:
关于上海酷乐生物科技有限公司
上海酷乐生物科技有限公司(ColeGen Biotechnology)是一家集研发、生产、销售、客户服务一体的高新技术企业。公司拥有核心的免提取Direct PCR技术,真正实现了“样本进、结果出”式的分子POCT。主要产品包括:分子诊断用PCR酶、各类型Direct qPCR Mix(常规型/可冻干型)以及科研用分子POCT检测试剂盒。
官网:www.colegen.com
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